猪乳中两种蛋白质的质谱鉴定

doi:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2021.07.019

湖北农业科学 ›› 2021, Vol. 60 ›› Issue (7): 103-105.doi: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2021.07.019

猪乳中两种蛋白质的质谱鉴定

越安琪¹, 罗卉卉¹, 黄卫平², 陈登权¹, 金素钰¹, 黄林¹, 郑玉才¹

1.西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041;
2.四川省凉山州畜牧兽医研究所,四川西昌 615400

收稿日期:2020-07-10 出版日期:2021-04-10 发布日期:2021-04-25
通讯作者: 郑玉才,教授,主要从事泌乳生物学、生化与分子遗传学研究,（电子信箱）yucaizheng65@hotmail.com。
作者简介:越安琪（1998-）,女,内蒙古鄂尔多斯人,在读本科生,研究方向为生物技术,（电话）18648038886（电子信箱）850803463@qq.com。
基金资助:
国家级大学生创新创业项目（201810656106）

Identification of two milk proteins of sow by mass spectrometry

YUE An-qi¹, LUO Hui-hui¹, HUANG Wei-ping², CHEN Deng-quan¹, JIN Su-yu¹, HUANG Lin¹, ZHENG Yu-cai¹

1. College of Life Science and Technology, Southwest Minzu University, Chengdu 610041,China;
2. Liangshan Animal Husbandry and Veterinary Research Institute, Xichang 615400, Sichuan,China

Received:2020-07-10 Online:2021-04-10 Published:2021-04-25

摘要/Abstract

摘要： 为鉴定猪乳中的蛋白质组分,研究采集了8头大白猪的全乳,经离心脱脂后,采用SDS-PAGE对脱脂乳中的蛋白质进行分离,然后切取凝胶上的3条蛋白质条带,经还原烷基化和胰蛋白酶解处理后,采用液相色谱-串联质谱分析产生的水解肽,以鉴定这3种低分子量蛋白质。结果表明,获得鉴定的2种蛋白质包括β-乳球蛋白（β-LG）和乳清酸蛋白（WAP）,其中WAP可能对猪乳的生物学功能有重要价值。

关键词: 猪, 乳, 蛋白质鉴定, 质谱

Abstract: In order to identify several protein components of porcine milk, whole milk samples of large white pigs （n=8） were collected, and skim milk was obtained by centrifugation. SDS-PAGE was employed to separate skim milk proteins, and tree protein bands on SDS-gel were cut off, followed by treatments of reductive alkylation and trypsin digestion. The resulting peptides were loaded on LC-MS/MS to identify the three proteins with low molecular weight. Two proteins including β-lactoglobulin （β-LG） and whey acidic protein （WAP） were identified successfully. WAP may probably affect porcine milk functions.

Key words: sow, milk, protein identification, mass spectrometry

中图分类号:

S828

越安琪, 罗卉卉, 黄卫平, 陈登权, 金素钰, 黄林, 郑玉才. 猪乳中两种蛋白质的质谱鉴定[J]. 湖北农业科学, 2021, 60(7): 103-105.

YUE An-qi, LUO Hui-hui, HUANG Wei-ping, CHEN Deng-quan, JIN Su-yu, HUANG Lin, ZHENG Yu-cai. Identification of two milk proteins of sow by mass spectrometry[J]. HUBEI AGRICULTURAL SCIENCES, 2021, 60(7): 103-105.

参考文献 18

[1]	ANDREAS N J,KAMPMANN B,MEHRING L K.Human breast milk: A review on its composition and bioactivity[J]. Early Hum Dev, 2015, 91(11):629-635.
[2]	TURCK D.Cow's milk and goat's milk[J]. World Rev Nutr Diet, 2013, 108:56-62.
[3]	李卫真, 邹思湘, 汤艾非,等. 二花脸猪初乳的蛋白质组分研究[J]. 南京农业大学学报, 1994, 17(3):81-85.
[4]	张军民,高振川. 猪乳中常规成分、胰岛素和表皮生长因子浓度的动态变化[J]. 中国兽医学报,2001,21(4): 388-391.
[5]	周雪,付利芝,杨柳,等. 荣昌猪初乳和常乳主要成分及钙含量分析[J]. 中国畜牧杂志,2015,51(23):76-78.
[6]	秦宜德, 邹思湘, 张海方,等. 猪乳中一组高分子量蛋白质的特异性、分泌特征和来源[J]. 农业生物技术学报,2004,12(3): 264-267.
[7]	秦宜德, 徐银学, 邹思湘,等. 猪乳中一组高分子量蛋白质的表达量与母猪泌乳性能关系的研究[J]. 畜牧兽医学报, 2004, 35(3):256-259.
[8]	QIN Y, QI N, TANG Y, et al.Isolation and identification of a high molecular weight protein in sow milk[J]. Animal, 2015, 9(5):847-854.
[9]	张水斌,黄卫平,郑玉才,等. 猪乳上皮黏蛋白(MUC1)和一组高分子量蛋白遗传多态性的研究[J].农业生物技术学报,2010, 18(3):514-518.
[10]	FRANKSHUN A L, HO T Y, STEINETZ B G, et al.Biological activity of relaxin in porcine milk[J]. Ann N Y Acad Sci, 2009, 1160:164-168.
[11]	OGAWA S, TSUKAHARA T, NISHIBAYASHI R, et al.Shotgun proteomic analysis of porcine colostrum and mature milk[J]. Anim Sci J, 2014, 85(4):440-448.
[12]	SALCEDO J, FRESE S A, MILLS D A, et al.Characterization of porcine milk oligosaccharides during early lactation and their relation to the fecal microbiome[J]. J Dairy Sci, 2016, 99(10):7733-7743.
[13]	FU W, LI C X, LIU W J, et al.Identification of differentially expressed proteins in the testes of normal yaks and sterile hybrids by two-dimensional electrophoresis and mass spectrometry[J]. Indian J Anim Sci, 2015, 85(11):1181-1186.
[14]	BRADFORD M M.A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding[J]. Anal Biochem, 1976, 72:248-254.
[15]	LAEMMLI U K.Cleavage of structural proteins during assembly of the head of bacteriophage T4[J]. Nature, 1970, 277:680-684.
[16]	RYSKALIYEVA A,HENRY C,MIRANDA G,et al.The main WAP isoform usually found in camel milk arises from the usage of an improbable intron cryptic splice site in the precursor to mRNA in which a GC-AG intron occurs[J]. BMC Genet,2019,20(1):14.
[17]	NUKUMI N, IWAMORI T, KANO K, et al.Whey acidic protein (WAP) regulates the proliferation of mammary epithelial cells by preventing serine protease from degrading laminin[J]. J Cell Physiol, 2007, 213(3):793-800.
[18]	IWAMORI T, NUKUMI N, ITOH K, et al.Bacteriostatic activity of whey acidic protein (WAP)[J]. J Vet Med Sci, 2010, 72(5):621-625.

猪乳中两种蛋白质的质谱鉴定

Identification of two milk proteins of sow by mass spectrometry

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献 18

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	杨玉平, 谢柏艳. 液质联用法同时测定保健食品中维生素B₁、维生素B₆、烟酸、烟酰胺和咖啡因的含量[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(9): 124-129.
[2]	杨伟, 李蓉, 毛永杨, 杨子秋, 李涛, 段宝忠. 石墨消解-电感耦合等离子体质谱法测定挂面中八种无机元素[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(9): 130-134.
[3]	赵浩健, 张焕春, 刘宁, 郭对田, 李淑平, 张丽丽, 邹晓宇, 杨剑超. 基于区块链技术的订单农业体系构建与运营策略——以长沙市宁乡县宁乡猪为例[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(8): 202-206.
[4]	罗发美, 毛静春, 黄莹睿, 周琴, 何希, 程龙. 液相色谱-串联质谱法测定白芍禁用农药残留[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(7): 130-136.
[5]	任明星, 肖涌, 付书林, 宗冰冰, 邱银生. 黄芩苷对猪源肠外致病性大肠杆菌的体内保护作用[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(5): 124-128.
[6]	尹家银, 喻娇, 唐青海, 滕威, 阳坤, 曹馨, 徐晴, 刘博, 李泽. 一株仔猪产肠毒素大肠杆菌分离鉴定、耐药性分析及其卵黄抗体的制备[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(4): 127-134.
[7]	盛丽. 青金桔精油的香气分析及应用[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(4): 146-150.
[8]	乔同同, 张宇, 李梓芃, 乔木, 秦振洋, 彭先文, 吴俊静. 猪NARS2基因变异与硒都黑猪胴体和肉质性状的关联分析[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(12): 195-199.
[9]	陈睿, 潘小芳, 杨楠, 霍丽妮, 陈姎玲, 梁天坚. 基于GC-MS和网络药理学探究茉莉花根挥发油镇静安神作用[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(11): 84-91.
[10]	谢云波, 易鸣, 童文羽, 曾智, 朱志强, 石义付. 高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中10种硝基咪唑类药物残留量[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(10): 172-177.
[11]	戴全武, 刘毅, 曾格格, 田宇, 黄振阳. 顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用分析桂枝、白芍及其药对的挥发性成分[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(10): 178-184.
[12]	陈俊秀, 马晓年, 张瑞雨, 梁志坚, 梁孟军, 李文廷. 气相色谱串联质谱法测定市售白酒中18种邻苯二甲酸酯类塑化剂[J]. 湖北农业科学, 2023, 62(1): 152-156.
[13]	谭建宁, 覃洁萍. ICP-MS法测定软胶囊壳中二十七种无机元素的含量[J]. 湖北农业科学, 2022, 61(9): 118-122.
[14]	李铮, 刘文超, 王世玉. 生猪产业创新生态系统运行机制及效率提升研究[J]. 湖北农业科学, 2022, 61(9): 192-196.
[15]	孙卿, 王家乡, 李鹏, 谢洋, 周诗钦, 吴艳. 非洲鸵鸟源乳酸菌的生物学特性研究[J]. 湖北农业科学, 2022, 61(8): 102-104.